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五步解析磁转染,深挖细节增效率   1952年,美国遗传学家阿尔弗雷德?赫尔希(Alfred DayHershey)和玛莎?蔡斯(Martha Cowles Chase)让全世界认识了携带遗传信息的DNA,掀开了基因时代的篇章。半个世纪过去了,基因测序技术发展的如火如荼,而基因转染技术乃至于基因治疗技术仍在摸爬滚打中艰?#20122;靶小?#22522;因转染是将特定的遗传信息传递到真核细胞中的技术,需要携带信息的DNA?#30333;?#26579;试剂。常规基因转染分为病毒载体法(生物学方法)?#33018;?#30149;毒载体法(非生物学方法)。目前,转染效?#39318;?#39640;的是病毒,但病毒的毒性及免疫原性大大提高了其研究难?#21462;?#38750;病毒载体,如阳离子脂质体、聚合物、纳米磁珠等,虽然由于不具备病?#31350;?#36234;细胞内障碍的能力,但其具有生物相容性好、可以大量生产的优势,所以?#32654;?#36733;体成为研究的热点,其研究的重点就是提高转染效率。首先我们来认?#26029;?#22522;因转染的过程。 图1 转染过程简图[1] A?#30418;?#24102;信息的DNA与转染试?#21015;?#25104;复合物。转染试剂的选择、缓冲液、pH、投料?#21462;?#21453;应浓度都会影响最后复合物的大小及稳定性,进而影响之后的转染效率。东纳生物的MagTransfTM磁转染磁珠表面修饰经过优选的阳离子聚合物,携带合适的正电荷,与负电荷的DNA通过静电作用结合形成稳定的复合物,同时MagTransfTM表面还修饰有生物相容性高分子,以提...
发布时间: 2019 - 07 - 09
浏?#26469;问?/span>1
Langmuir封面文章揭示聚苯乙烯微球表面抗体取向偶联的一般方法和原理,更好指导体外诊断试剂开发       纳米探针已经在体外诊断领域得到?#26031;?#27867;的应用。?#27426;?#22312;一般方法中,抗体通常是方向随机地吸附或偶联在纳米颗粒载体?#24076;?#20854;抗原识别位点容易被占用或受到空间位阻的影响,导致纳米探针对抗原的特异性结合能力降低。为了?#32435;?#25239;体取向,使更多抗原结合位点充分暴露,研究者们提出了一系列新方法,代表性的技术包括利用抗体特殊位点(如Fc端寡糖链、铰链区二硫键)、引入夹层蛋白(如蛋白A、蛋白G、蛋白L)、分子印迹、抗体融合His-tag?#21462;?#36825;些方法通常操作步骤比较复杂,成本较高,或需要对抗体改性,或需要引入新的组分,不易向?#23548;?#24212;用中转化。       近日,东南大学生物科学与医学工程学院与南京东纳生物科技有限公司的研究者共同开发了一种简单的抗体取向结合在聚苯乙烯纳米颗粒表面的方法,即基于大家熟悉的EDC/Sulfo-NHS交联法,调整抗体和载体纳米颗粒的反应pH,并将这一条件下制备的探针用于心肌肌钙蛋白I 侧向免疫层析检测。结果表明,抗体结合量和结合取向以及抗原检测灵敏度都得到了显著提高。虽然调节pH值是优化抗体结合常用的手段,但本文首次深入探讨了?#27308;?#27573;增强抗体取向的机制,并揭示了抗体密?#21462;?#30005;荷分布和亲疏水性的重要性,物理...
发布时间: 2019 - 05 - 24
浏?#26469;问?/span>37
酸敏性金纳米颗粒聚集体实现肿瘤放疗增敏 肿瘤放射治疗(RT)通常与化疗和?#36136;?#27835;疗相结合,在肿瘤病人临床治疗中占有重要的地位。为了杀死癌细胞,毫无疑问需要采用高剂量?#32435;?#32447;进行放射治疗,从而会对相邻的正常组织产生破坏。?#27426;?#37319;用反复低剂量?#32435;?#32447;对肿瘤进行放射治疗,有可能促进肿瘤组织产生耐受性,由此导致RT疗效显着降低。放疗增敏剂可以在提高RT疗效的同?#33519;檔投?#27491;常组织的损伤,目前临?#37319;?#24120;用的这类放疗增敏剂为硝基咪唑类或硝基苯衍生物,?#32654;?#33647;物往往具有较大的毒副作用,其临床应用因此受到了限制。因此需要发展更为理想的放疗增敏剂。理想的放疗增敏剂通常具有以下特征?#27627;?#22909;?#32435;?#29289;相容性;增强的肿瘤聚集和保留性能;分布于其他组织时,快速?#32435;?#33039;清除功能。金原子与其他原子相?#26579;?#26377;较高的X射线及伽马射线吸收系数,可在X射线下清晰造影。同时金纳米颗粒具有良好?#32435;?#29289;相容性,可作为一种理想的放疗增敏剂。?#27426;?#37329;纳米颗粒在体内很难同时满足长时间的肿瘤保留性及分布于其他组织的快速清除性,满足增大放疗效率及提高放疗特异性。通常来说不同尺寸的纳米材料在药物传递时会显示出不同的特征:对于尺寸小于10纳米的小尺寸纳米材颗粒,很容易被肾脏清除掉,因而循环时间短,减小了在肿瘤中的累积?#27426;?#23610;寸10-100 nm的纳米颗粒,虽然具有较长的血液循环时间,通过EPR效应可累积于肿瘤组织,但是肝脏、脾脏等器官的吞噬截?#32679;?#28982;是主要的障...
发布时间: 2019 - 05 - 05
浏?#26469;问?/span>27
?#20122;?#38142;接:
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